POTENCIAL ANTIBACTERIANO DO EXTRATO DE Malpighia emarginata FRENTE À Bacillus cereus EM COMPARAÇÃO COM NITRITO DE SÓDIO
1JORCILENE DOS SANTOS SILVA, 2OTÁVIO AKIRA SAKAI, 3BEATRIZ CERVEJEIRA BOLANHO BARROS, 4ZILDA CRISTIANI GAZIM, 5MARIA GRACIELA IECHER FARIA NUNES, 6SUELEN PEREIRA RUIZ HERRIG
1Discente do Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Aplicada à Agricultura, Universidade Paranaense, Umuarama, Paraná, Brasil. 2Docente do Programa de Pós-Graduação em Sustentabilidade, Universidade Estadual de Maringá, Umuarama, Paraná, Brasil. 3Docente do Programa de Pós-Graduação em Sustentabilidade, Universidade Estadual de Maringá, Umuarama, Paraná, Brasil. 4Docente da UNIPAR 5Docente da UNIPAR 6Docente da UNIPAR
Introdução: Malpighia emarginata, popularmente conhecida como acerola, é uma fruta tropical proveniente da América Central, Noroeste da América do Sul e Antilhas, que frutifica praticamente o ano todo em regiões de clima tropical (Vieira et al., 2019). O processamento de M. emarginata gera subprodutos que  podem chegar a 40% do seu peso total, cuja composição apresenta substâncias bioativas como flavonoides, antocianinas e ácido ascórbico (Santos et al., 2023). Os extratos de subprodutos de M. emarginata contém compostos com potencial atividade antioxidante e antibacteriana (Wang et al., 2019). Um desafio na microbiologia de alimentos são as doenças de transmissão hídrica e alimentar (DTHA), como exemplo as causadas por Bacillus cereus, uma bactéria Gram-positiva produtora de toxinas e facultativamente anaeróbica, encontrada na vegetação, solo e em alimentos (McDowell et al., 2023). Neste contexto o extrato do subproduto pode contribuir como uma alternativa na conservação de alimentos tendo em vista os danos ocasionados pelos conservantes sintéticos, como por exemplo o nitrito de sódio que pode ocasionar danos à saúde humana (Attia et al., 2021). Objetivo: Avaliar a atividade antibacteriana do extrato do subproduto de M. emarginata frente a B. cereus em comparação com nitrito de sódio. Material e Métodos: O subproduto de M. emarginata foi obtido de uma indústria processadora de polpa de frutas em Umuarama/PR. O subproduto foi seco a 50°C em estufa com circulação de ar por 48h e posteriormente triturado em moinho e classificado em mesh 42. O extrato etanólico do subproduto foi obtido pela extração na proporção 1:10 (m/v) por esgotamento em equipamento de agitação orbital à de 30 ºC,  sob agitação de 90 rpm, por 96 horas, utilizando etanol 70 % como solvente. A cepa bacteriana utilizada foi Bacillus cereus  ATCC 12228. Foi realizada a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) através do método de microdiluição em caldo em microplacas de 96 poços (CLSI, 2015). O extrato foi avaliado na faixa de 0,037 a 38,15 mg/mL e foi utilizado nitrito de sódio como aditivo controle na faixa de 1,25 a 100 mg/mL. A leitura foi feita com a adição de 20 μl de revelador 2,3,5-cloreto de trifeniltetrazólio (Reatec®) a 1,0% em cada poço e posteriormente foi realizada a incubação das microplacas a 37º C por 20 min. A menor concentração que resultou na inibição do crescimento visual foi definida como a CIM. A concentração bactericida mínima (CBM) foi realizada pelo subcultivo de 10 µl de cada poço. As placas foram incubadas por 24 h à 35 ºC e após foi realizada a leitura. Resultados: O extrato etanólico do subproduto de M. emarginata apresentou CIM de 5,00 mg/mL e o nitrito de sódio  12,5 mg/mL. Os valores de CBM foram de 20,00 mg/mL para o extrato etanólico e 100 ± 0,00 mg/mL para o nitrito de sódio. O extrato do subproduto apresentou CIM  2,5 vezes e CBM 5 vezes menores que o nitrito de sódio, mostrando maior potencial antibacteriano. Discussão:  A atividade antibacteriana do extrato do subproduto de M. emarginata podem estar relacionados aos compostos fenois e flavonoides presentes em sua composição, a qual se relaciona a modos de ação distintos para ligar os fosfolipídios da membrana bacteriana, o que resulta na interrupção da força motriz do próton (Song et al., 2022). De acordo com Santos et al. (2023), o extrato do subproduto de M. emarginata  apresenta em sua composição concentrações elevadas de compostos fenólicos 9,0364 ± 0,3764 mg EAG/g, onde destacam-se flavonoides como rutina, miricetina e catequina e cuja atividade antibacteriana está relacionada principalmente à presença de catequina devido apresentar maior concentração (0,3251 ± 0,0375 mg/mL). No estudo de Stafussaa et al. (2021) avaliaram a bioacessibilidade, de M. emarginata, que apresentou CIM de 12,50 mg/mL para B. cereus, valor superior ao encontrado neste trabalho. Não foram encontrados mais trabalhos avaliando extrato de M. emarginata  através do método de microdiluição em caldo em microplaca de 96 poços frente B. cereus, entretanto, Comichiol et al. (2024) encontraram valores de CIM para Escherichia coli e Staphylococcus aureus de 15,6 e 7,8 mg/mL para o extrato liofilizado de concentrados de vitamina C de M. emarginata. No presente estudo, o extrato etanólico de M. emarginata apresentou CIM e CBM menores do que o nitrito de sódio. Com base nos resultados alcançados neste trabalho, qualificando como uma alternativa promissora ao conservante sintético. Nitrito de sódio, é amplamente utilizado em produtos cárneos, mas que, ao reagir no ambiente ácido do estômago, pode originar nitrosaminas ou radicais livres. Essas substâncias estão associadas ao aumento da peroxidação lipídica e a diversos riscos à saúde, afetando diferentes órgãos do corpo. As espécies reativas de nitrogênio, resultantes desse processo, podem desencadear efeitos tóxicos significativos, incluindo a desregulação das respostas inflamatórias, além de danos hepáticos (hepatotoxicidade) e renais (nefrotoxicidade) (Attia et al.,2021). Conclusão: Conclui-se que o extrato de M. emarginata possui potencial antibacteriano contra B. cereus  apresentando maior atividade antibacteriana do que o nitrito de sódio, podendo assim ser um potencial para ser utilizado como conservante natural na indústria alimentícia em substituição total ou parcial do nitrito de sódio.
Referências: Attia, G. H. et al. Synergistic Effect of Mandarin Peels and Hesperidin with Sodium Nitrite against Some Food Pathogen Microbes. Molecules, v. 26, 2021. CLSI-Clinical and Laboratory Standards Institute. Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests. Approved Standard M07-A10. CLSI, Wayne, 2015. Comichiol, F. M. et al. Enhanced antioxidant and antimicrobial properties of lyophilized vitamin c concentrates from Malpighia emarginata (acerola): a comparative study. Ciência e Natura, v. 46, e83711, 2024. McDowell, R. H.; Sands, E. M.; Friedman, H. Bacillus Cereus. Atualizado em 23 de janeiro de 2023. Em: StatPearls [Internet]. Treasure Island, FL: StatPearls Publishing, jan. 2025. Disponível em: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK459121/. Acesso em: 11 ago. 2025. Santos, E. N. et al. From waste to wonder: Unleashing the antimicrobial and antioxidant potential of acerola residue using a central composite rotatable design. Journal of Environmental Chemical Engineering, v. 11, 2023. Song, L. et al. Antibacterial Modes of Herbal Flavonoids Combat Resistant Bacteria. Frontiers in Pharmacology, v. 13, 2022. Stafussa, A. P. et al. Bioactivity and bioaccessibility of phenolic compounds from Brazilian fruit purees. Future Foods, v. 4,  2021. Vieira, T. C. et al. Prospecção Científica e Tecnológica de Malpighia emarginata DC. (Malpighiaceae): espécie economicamente importante. Cadernos de Prospecção – Salvador, v. 13, n. 3, p. 862-874, 2019. Wang, K. et al. Development of grapefruit seed extract-loaded poly(ε-caprolactone)/ chitosan films for antimicrobial food packaging. Food Packaging and Shelf Live. v. 22, p. 100396, 2019.